細胞系或細胞株的建立鑑定管理 | 國產維生素膠囊大剖析
2017年12月9日—從一個經過鑑定的細胞系採用選擇法或單細胞克隆進一步所得到的細胞群,常被稱細胞株(cellstrain)。由原細胞株進一步分離培養出的與原株 ...
原代代培养物经第一次传代培养后的细胞,常被称为细胞系(cell line)。由某一细胞系分离出来的、在性状上与原细胞系有一定差异的细胞系,常被称为该细胞系的亚系(subline)。从一个经过鉴定的细胞系采用选择法或单细胞克隆进一步所得到的细胞群,常被称细胞株(cell strain)。由原细胞株进一步分离培养出的与原株性状不同的细胞群,又被称为亚株(substrain)。 一、细胞建系的一般程序 细胞建系的一般程序包括原代培养、第一次传代、常规传代、冻存与复苏等过程。所涉及的原代培养、第一次传代、常规传代、冻存与复苏等过程的具体方法与常规的原代培养等技术并无二样。 相对于那些只需要提供供体性别、年龄、取材部位、组织种类以及几项简单指标的仅用作原代培养的细胞而言,对于用于建系的细胞通常有以下一些要求: (一)细胞的组织来源 应详细说明细胞供体所属物种、供体的年龄、性别、取材的器官或组织,如系肿瘤组织,还应说明临床病理诊断结果,组织来源以及病例号等。 (二)培养条件和方法 各种细胞都有自己比较适应的生存环境,因此应指明适合该细胞系生长的培养基、血清种类、用量以及细胞生存的适宜pH值等。 (三)细胞生物学检测 这部分工作常放在对细胞系的鉴定这一环节进行。 二、对已建立细胞系的鉴定、管理 (一)对已建立细胞系的鉴定 要求能提供细胞的一般和特殊的生物学性状指标。一般特性指标包括:细胞的一般形态、特异性结构、细胞生长曲线和分裂指数、倍增时间、接种率、染色体分析、同工酶检查、DNA指纹图谱等。 1.对正常细胞系的鉴定 对正常细胞系的鉴定主要围绕以下四个方面进行:①鉴定细胞的种系来源:常用方法主要有染色体分析、同工酶分析、DNA指纹图谱等技术;②鉴定细胞的组织来源:可通过形态学手段、检测组织特异性抗原等进行鉴定;③细胞是否发生转化和恶变:主要通过核型分析、细胞生长行为观察(是否丧失接触抑制)、裸鼠成瘤实验等进行鉴定;④细胞有无发生交叉污染,主要通过同工酶及DNA指纹图谱技术进行鉴定。 2.对肿瘤细胞系的鉴定 对肿瘤细胞系的鉴...
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