Plasmid extraction | 國產維生素膠囊大剖析
質體為分子生物學實驗中不可或缺的載體,質體為細胞內環狀DNA片段,在宿主細胞核外仍然能進行DNA複製,包含複製起始點(Originofreplication)、細菌 ...
Plasmid extraction | 原理介紹
質體為分子生物學實驗中不可或缺的載體,質體為細胞內環狀DNA片段,在宿主細胞核外仍然能進行DNA複製,包含複製起始點 (Origin of replication)、細菌抗生素 (Antibiotic resistance gene)、細胞抗生素 (Selectable marker)、多克隆位點 (Multiple cloning site)、Insert、啟動子 (Promoter) 及引子結合位點 (Primer binding site)。
質體製備包含三個步驟:(1)細菌培養放大 (2)菌體收集與裂解 (3)質體純化。而目前最常使用的Plasmid extraction方法為鹼性溶解法(Alkaline lysis)。以下介紹使用試劑與功用:
(1) Solution 1:將菌體懸浮於溶液中
成分
功用
25 mM Tris-HCl(pH8.0)
緩衝溶液,維持pH值穩定
10 mM EDTA ...
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